Velocidad de conducción nerviosa y Fisiología de la contracción muscular

Velocidad de conducción nerviosa y Fisiología de la contracción muscular

VELOCIDAD DE CONDUCCIÓN NERVIOSA Y FISIOLOGÍA DE LA CONTRACCIÓN MUSCULAR (CADWELL)

Objetivos de aprendizaje

  • Describir las características del acoplamiento excitación-contracción en el músculo esquelético.
  • Demostrar el concepto de umbral al estimular nervios motores periféricos
  • Integrar la fisiología nerviosa y muscular en los estudios de velocidad de conducción nerviosa y electromiografía.

Resultados de aprendizaje

  • Explica los mecanismos que participan en la transmisión neuromuscular y en la contracción muscular a través de los resultados de la práctica de laboratorio.

Glosario de términos

 

Ánodo: En un estimulador eléctrico, el ánodo es el polo positivo, hacía donde migran los electrones desde el cátodo (polo negativo).

Cátodo: En un estimulador eléctrico, el cátodo es el polo negativo, desde donde migran los electrones hacía el ánodo (polo positivo).

Contracción isométrica: Es el tipo de contracción en la cual se genera tensión del músculo, pero las fibras musculares se mantienen su longitud.

Contracción isotónica: Es la contracción en la que se mantiene una tensión constante en el músculo a medida que cambia de longitud.

Latencia: Tiempo que transcurre desde el inicio del estímulo hasta el inicio de la respuesta.

Unidad Motora: Unidad funcional para describir el control neuronal del proceso de contracción muscular. Cada unidad motora consiste en una motoneurona y todas las fibras musculares que inerva.

Fatiga: Incapacidad para seguir generando un nivel de fuerza o una intensidad de ejercicio determinada.

Tetania: Trastorno caracterizado por un aumento de la excitabilidad de los nervios, espasmos musculares dolorosos, temblores o contracciones musculares intermitentes, provocados por una alteración hidroelectrolítica o metabólica (hipocalcemia, hipomagnesemia, alcalosis)

    1. Introducción

    Los estudios electrofisiológicos de electromiografía (EMG) y velocidad de conducción nerviosa (VCN), son técnicas diagnósticas de utilidad en la exploración del sistema nervioso periférico y del aparato musculoesquelético y la relación que existe entre ambas.

     

    1.1 Velocidad de Conducción Nerviosa

    Los estudios de conducción nerviosa son técnicas electrofisiológicas que permiten estudiar la propagación del impulso nervioso en cualquier nervio periférico que puede ser sensitivo, motor o mixto.

    Son especialmente útiles para el diagnóstico de la enfermedad de nervios periféricos (neuropatía), o como seguimiento de la recuperación tras una lesión. La valoración de la velocidad de conducción nerviosa (VCN) permite comparar los nervios de las extremidades o de regiones proximales de manera bilateral.

    El sistema nervioso periférico se compone de dos grandes grupos de fibras nerviosas: mielinizadas y no mielinizadas. La velocidad de conducción de una neurona depende del diámetro del axón y de la presencia de mielina que lo recubre. Cuanto mayor es el diámetro del axón, mayor es la velocidad de conducción de los potenciales de acción (clasificación de Erlanger y Gasser, tabla 1). En los humanos es posible medir la velocidad de conducción de grandes nervios, mediante el registro de los potenciales de acción, medidos extracelularmente sobre la superficie de la piel que cubre al nervio o mediante la activación del músculo que inervan. Los potenciales sensitivos se registran directamente sobre las fibras sensitivas del nervio con electrodos de superficie dispuestos sobre el trayecto del nervio.

    Tabla 1. Se describen los tipos de fibras nerviosas, si tienen mielina, la velocidad de conducción, el diámetro y el tipo de información que transmiten.

    El potencial motor compuesto registra la actividad eléctrica generada por la contracción muscular resultante de la estimulación de un nervio con fibras motoras y se registra con electrodos de superficie sobre el músculo específico. Para el registro, normalmente se utilizan 2 electrodos de superficie, donde un electrodo es activo y el otro es referencial. Se ponen en contacto con el músculo o sobre el nervio sensitivo.

    El electrodo activo tiene una localización proximal y el referencial se localiza distalmente. Estos 2 electrodos reciben el estímulo que provocamos en el nervio correspondiente. Para la estimulación, usualmente se usa un electrodo bipolar, donde un pulso de corriente se genera entre el cátodo, y el ánodo; este pulso de corriente despolariza al nervio adyacente y genera un potencial que se propaga a través de este.

    Dicho estímulo debe realizarse de forma creciente hasta asegurar un estímulo máximo, es decir, un 20% superior al que evoca un potencial de amplitud máxima. En cada paciente varía la intensidad del estímulo dependiendo de varios factores, tales como, el grado de relajación del músculo, las condiciones de la piel, la presencia de edema, la cantidad de tejido adiposo, etc.

    Los parámetros por estudiar son los siguientes:

    Latencia inicial: Es el tiempo transcurrido entre la estimulación y la aparición de la respuesta en un sitio de registro. Se mide en milisegundos (ms).

    – Velocidad de conducción: se expresa en metros por segundo (m/s) y refleja la velocidad con la que se propaga el estímulo a través del nervio, desde la estimulación distal hasta la proximal en la conducción motora (VCM). Se expresa como resultante de la diferencia entre las latencias iniciales del potencial registrado en un sitio proximal y uno distal entre la distancia medida en milímetros (mm) que hay entre ambos estímulos.

    Características del potencial: Se evalúa la forma, amplitud, duración y área bajo la curva. Las fibras nerviosas de mayor diámetro de los nervios periféricos conducen la corriente eléctrica por encima de 45 m/s transmitiendo el impulso de forma saltatoria entre los nódulos de Ranvier hasta llegar al músculo.

     

    1.2 Electromiografía

    Se utiliza el término electromiografía (EMG) para referirse a las técnicas utilizadas en el estudio funcional del sistema neuromuscular tanto en reposo como durante una contracción. Su fundamento eléctrico se basa en el registro de potenciales bioeléctricos. Los equipos de EMG para el registro y análisis de los potenciales de acción del músculo están compuestos por electrodos de superficie o aguja que captan la señal y, una vez amplificados y filtrados, son convertidos en una señal digital. Además de la señal digital visual, los aparatos de EMG tienen altavoces para la captación acústica de la señal analógica.

    Patrón de descarga de la unidad motora. La unidad motora está formada o constituida por una sola neurona motora inferior (incluyendo el cuerpo celular y sus prolongaciones) y todas las fibras musculares inervadas por las ramificaciones de su axón.

    El músculo de un sujeto sano en reposo no muestra actividad eléctrica alguna en el EMG. Una contracción voluntaria media causa descargas de bajas frecuencias (1 o 2 impulsos por segundo), de una o pocas unidades motoras.  El esfuerzo incrementa la fuerza muscular y se asocia con dos cambios relacionados pero separados en el patrón de descarga de la unidad motora: a) reclutamiento de las unidades previamente inactivas, y b) mayor rapidez en el disparo de las unidades ya activadas.

    Un sujeto sano puede ser capaz de activar una o dos unidades motoras inicialmente. Las unidades motoras activadas son pequeñas y probablemente representan las fibras musculares de tipo I. Aquellas que son reclutadas más tarde son considerablemente más grandes y reflejan la participación de las unidades de tipo II, a esto se le conoce como “principio de tamaño” o “ley de Henneman” (figura 1). Normalmente la frecuencia de disparo es de 10 a 12 Hz.

    Figura 1. La Ley de Henneman o el “principio del tamaño») establece que, dado que el tamaño de las motoneuronas determina su umbral de excitación, durante la aplicación de una fuerza muscular las unidades motoras de menor tamaño serán las primeras en reclutarse, y en la medida en que el esfuerzo lo requiera, se irán reclutando más unidades motoras en un patrón estereotipado según su progresivo tamaño (Parodi, 2017).

     

    Patrón de reclutamiento o interferencia. Cuando se incrementa la fuerza de contracción, se van sumando un mayor número de unidades motoras activas que empiezan a disparar rápidamente. La activación simultánea de muchas unidades motoras es un fenómeno llamado reclutamiento y no permite el reconocimiento de potenciales de unidades motoras individuales. Esta respuesta sumatoria usualmente se refiere como patrón de interferencia. Este patrón es una medida de la densidad o número de espigas que se generan y el promedio de amplitud de todos los potenciales de la unidad motora. La configuración y la frecuencia de disparo de cada potencial de la unidad motora, depende del número de neuronas motoras capaces de estar descargando. Al analizar el patrón de interferencia, es importante determinar no sólo cómo descargan las unidades motoras, sino también el número de unidades disparando proporcionalmente para alcanzar la fuerza muscular ejercida. El músculo a máximo esfuerzo es el resultado de la contracción de todas las unidades motoras funcionantes en el músculo en cuestión. Durante el esfuerzo máximo, las unidades motoras aisladas descargan a frecuencias en el rango de 25 a 50 impulsos por segundo. En el músculo normal aparece un trazado muy rico o interferencial que borra la línea base como consecuencia de que las unidades motoras aumentan de frecuencia de contracción y a su vez hay un mayor reclutamiento de unidades motoras.

    1. Actividad en la clase 

     

    2.1 Preguntas

    Actividad 1. En parejas respondan las siguientes preguntas:

    1. ¿Es la fuerza de tu brazo derecho diferente a la de tu brazo izquierdo?
    2. Cuándo se sostiene un objeto de manera constante, ¿el número de unidades motoras permanece igual? ¿Son usadas las mismas unidades motoras durante todo el tiempo que se sostiene el objeto?
    3. Con la fatiga, la fuerza muscular disminuye, ¿qué proceso fisiológico explica la declinación en la fuerza?
    4. Define unidad motora.
    5. Define reclutamiento de unidades motoras.
    6. Define fatiga.
    7. Define EMG.
    8. Define dinamometría.

    Actividad 2. Velocidad de conducción nerviosa y electromiografía

    Sujetos y materiales para la práctica:

    • 2 voluntarios para realizar un registro continuo (hombre y mujer)
    • Electromiógrafo Cadwell con estimulador
    • Computadora (figura 2) con software Sierra Wave
    • Juego de electrodos de superficie con cables
    • Gel conductor
    • Algodón y alcohol
    • Cinta métrica

    Figura 2. Equipo Cadwell, con equipo de cómputo y estimulador

     

    2.1 Práctica de Velocidad de conducción nerviosa

     

    Colocación de los electrodos 

     

    Para la realización de esta práctica, siga las instrucciones del docente.

    1) En la sección de ayuda del programa (ver manual operativo, o en la sección “help” del programa) se señalan claramente los puntos de estimulación y registro para la exploración de diferentes nervios. Pueden seleccionar distintos nervios, sin embargo, recomendamos el nervio mediano.

    Figura 3. Ejemplo de técnica adecuada de estimulación, proximal 2A y distal 2B de nervio mediano.

    2) Obtenga los registros de la actividad nerviosa a diferentes distancias de la ubicación de los electrodos de estimulación. Debe haber medido dichas distancias para poder calcular.

    3) Obtenga registros de velocidad de conducción de fibras motoras y mida las velocidades de conducción.

    4) Si es posible, se puede sumergir el brazo en agua fría o tibia y comparar lo obtenido con el brazo a temperatura ambiente, para que se evidencien los cambios de VNC con los cambios de temperatura.

    5) Mediante el programa del equipo puede usted medir para ambos tipos de potenciales la latencia inicial, la latencia terminal, amplitud base y amplitud pico. Y en base a ellos obtener duración del potencial, área de este y al ingresar la distancia entre estímulos proximal y distal obtener también la velocidad de conducción.

    6) Midan diferentes nervios y compare de manera bilateral los resultados.

    7) Midan a diferentes compañeros de la clase.

    8) Tabulen sus resultados y compare los registros obtenidos para los diferentes estímulos utilizados y para vías motoras y sensitivas.

    9) Comparen los resultados de todos los alumnos medidos.

    10) Evalúen si los valores de latencia, velocidad y amplitud se encuentran dentro de los valores de referencia (el programa muestra los valores de referencia, ver el manual operativo).

    11) ¿Qué diferencias son evidentes en la morfología, amplitud, duración y latencias de los potenciales motores contra los sensoriales?

    12) ¿Encuentra alguna diferencia entre los registros de un voluntario masculino y un femenino?

     

    2.3 Desarrollo de la práctica de electromiografía

    Obtención de un electromiograma de superficie (EMG) estándar: 

    1) En un voluntario, seleccione el músculo del que se obtendrá el registro, bíceps braquial, por ejemplo. La superficie deberá estar descubierta, la región deberá estar libre de ropa, pulseras, relojes, etc.

    2) Limpie con algodón y alcohol la región en donde se colocarán los electrodos de superficie.

    3) Coloque un electrodo cerca de la inserción proximal del músculo en estudio y otro cerca de la inserción distal, de manera que queden paralelos a las fibras del músculo (esta ubicación se puede variar dependiendo de la longitud del músculo a explorar). Para la colocación adecuada de los electrodos, puede en la ventana del programa “ayuda”, seleccione el “EMG”, se abrirá una lista de los músculos que puede explorar y donde debería colocar los electrodos (figura 4).

    4) Coloque un tercer electrodo en cualquier otra parte del cuerpo, alejado del sitio donde se encuentren los electrodos de registro.

    5) Una vez activado el sistema de registro se puede obtener un registro inicial como el que se muestra a continuación:

    Figura 4. Manual de referencias para la colocación de los electrodos.

     

    Obtención del EMG en diversas condiciones

     

    En un voluntario, comience el registro de la actividad muscular (figura 5) y realicen las siguientes maniobras:

    1) Contracción isotónica: Coloque los electrodos en los extremos del bíceps braquial y pida al paciente que levante un peso de valor conocido, registre el EMG de dicho movimiento.

    2) Contracción isométrica: Coloque los electrodos en los extremos del bíceps braquial y pida al paciente que mantenga levantado el peso, manteniendo un ángulo de 45° entre el brazo y el antebrazo, registre el EMG de este fenómeno.

    3) Reclutamiento de unidades motoras: Con la misma preparación se pedirá al paciente que levante un peso cuyo valor se irá incrementando paulatinamente. Registre el EMG durante toda la operación.

    4) Fatiga de contracción: Con la misma preparación pida al voluntario que realice flexiones y extensiones del antebrazo sobre el brazo hasta que la amplitud y duración del fenómeno eléctrico que registra se reduzca en al menos un 50%.

    Figura 5. Electromiograma típico, en las abscisas se encuentra el tiempo (ms), en las ordenadas el voltaje (mV)

    Resultados Práctica EMG

    El registro que usted obtuvo se puede analizar de varias maneras. La más sencilla es medir la duración y la amplitud (voltaje) de la descarga eléctrica que se produce cuando se contrae el músculo contra una carga cero o en el reposo. Es decir, cuando no se le aplica ninguna resistencia, y se compara con la magnitud y duración de esta descarga cuando se aplican resistencias sucesivas. Estos valores, de voltaje y duración de cada contracción, se pueden representar en una gráfica que relacione el peso levantado respecto a las características eléctricas de la contracción.

    Para finalizar, respondan:

    1) ¿Puede usted medir la intensidad de la contracción en los registros obtenidos?

    2) De ser así, ¿de qué magnitud es? Si la respuesta es negativa ¿cuál es la razón? ¿Qué otro tipo de análisis se puede hacer?

    3) ¿Cómo se modifica el EMG al aumentar la carga?

    4) ¿Qué cambios ocurren cuando se fatiga el músculo?

    5) ¿El EMG cambia según el músculo?

    6) ¿Si cambia la posición de los electrodos también lo hace la forma del EMG?

     

    1. Bibliografía

     

    • Berne & Levy. Fisiología. 7ª Edición. Madrid: Elsevier. 2018.
    • Fisiología Humana. Editorial Panamericana, 2018.
    • Fernández, J. M., Acevedo, R. C., y Tabernig, C. B. (2007). Influencia de la fatiga muscular en la señal electromiográfica de músculos estimulados eléctricamente. Revista EIA, (7), 111-119. ¿Recuperado de http://www.scielo.org.co/ scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1794-12372007000100010
    • Hall, J.E. (2016). Guyton y Hall. Tratado de fisiología médica. Barcelona, España: Elsevier.
    • Massó, N., Rey, F., Romero, D., Gual, G., Costa, L., & Germán, A. (2010). Aplicaciones de la electromiografía de superficie en el deporte. Apunts Sports Medicine, 45(166), 127-136. Disponible en: https://raco.cat/index.php/Apunts/article/view/196617/298837
    • Moreno Quinchanegua, J. E. (2018). LA FATIGA, TIPOS CAUSAS Y EFECTOS. Revista Digital: Actividad Física Y deporte, 3(2). https://doi.org/10.31910/rdafd.v3.n2.2017.376
    • Parodi Feye, A. S. (2017). Análisis crí­tico de la Ley de Henneman. Educación Física Y Ciencia, 19(2), e032. https://doi.org/10.24215/23142561e032
    • Robergs, R. A., Ghiasvand, F., y Parker, D. (2004). Biochemistry of exercise-induced metabolic acidosis. American journal of physiology. Regulatory, integrative and comparative physiology, 287(3), R502–R516. doi: 10.1152 / ajpregu.00114.2004

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      VELOCIDAD DE CONDUCCIÓN NERVIOSA Y FISIOLOGÍA DE LA CONTRACCIÓN MUSCULAR (SOFTWARE Y HARDWARE LIBRE)

      Objetivos de aprendizaje

                           Antes de esta práctica, los estudiantes deberían ser capaces de:

          • identificar y describir la función de diferentes componentes y compartimentos celulares (ej. membrana plasmática, retículo endoplasmático)
          • comprender los conceptos básicos de la generación de potenciales de acción, ej. en la unión neuromuscular
          • explicar conceptos básicos de física, como función de palanca, trabajo y fuerza

            Durante esta práctica, los estudiantes:

            • aprenderán cómo registrar electromiogramas (EMG) de músculos esqueléticos
            • observarán y registrarán cambios en el EMG cuando los músculos se contraen y relajan
            • investigarán los efectos de cambiar la velocidad y fuerza de contracción en la EMG
            • compararán y contrastarán registros de tres sistemas de palanca diferentes en el cuerpo

            Después de esta práctica, los estudiantes deberían ser capaces de:

          • explicar la relación entre la actividad eléctrica de las células musculares y la contracción
          • comprender los conceptos básicos del registro EMG
          • diseñar experimentos adicionales para investigar la actividad de diferentes músculos.

        Glosario de términos

        Ánodo: En un estimulador eléctrico, el ánodo es el polo positivo, hacía donde migran los electrones desde el cátodo (polo negativo).

        Cátodo: En un estimulador eléctrico, el cátodo es el polo negativo, desde donde migran los electrones hacía el ánodo (polo positivo).

        Contracción isométrica: Es el tipo de contracción en la cual se genera tensión del músculo, pero las fibras musculares se mantienen su longitud.

        Contracción isotónica: Es la contracción en la que se mantiene una tensión constante en el músculo a medida que cambia de longitud.

        Latencia: Tiempo que transcurre desde el inicio del estímulo hasta el inicio de la respuesta.

        Unidad Motora: Unidad funcional para describir el control neuronal del proceso de contracción muscular. Cada unidad motora consiste en una motoneurona y todas las fibras musculares que inerva.

        Fatiga: Incapacidad para seguir generando un nivel de fuerza o una intensidad de ejercicio determinada.

        Tetania: Trastorno caracterizado por un aumento de la excitabilidad de los nervios, espasmos musculares dolorosos, temblores o contracciones musculares intermitentes, provocados por una alteración hidroelectrolítica o metabólica (hipocalcemia, hipomagnesemia, alcalosis).

         

        1. Resumen

         

        En esta práctica experimental, los estudiantes aprenden sobre la estructura y función muscular, y cómo los músculos proporcionan la fuerza para mover diferentes partes del cuerpo humano. Los estudiantes aprenden a realizar registros de sus músculos esqueléticos usando electromiografía, registrando músculos de los tres tipos de sistemas de palanca. Esta práctica está diseñada para ayudar a los estudiantes a comprender la biomecánica del sistema musculoesquelético, y cómo el movimiento se relaciona con la actividad eléctrica en células musculares. La duración de la práctica puede ser tan corta como 30 minutos o hasta 2 horas, dependiendo del número de músculos registrados y la complejidad de las diferentes actividades exploradas.

         

        1. Introducción

         

        Los músculos esqueléticos proporcionan fuerza para mover ‘palancas’ en el cuerpo humano

        Los movimientos del sistema musculoesquelético humano se logran mediante conjuntos de huesos, articulaciones y músculos que trabajan juntos de forma muy similar a los sistemas de palanca [Open Learning Initiative, 2016, Guyton and Hall, 2016, Betts et al., 2013]. Una palanca está compuesta por una barra o varilla rígida (el brazo de palanca) que gira alrededor de un punto fijo (el fulcro) y puede mover una carga o superar una resistencia cuando se aplica una fuerza. Las palancas se agrupan en tres clases, dependiendo de la colocación relativa del fulcro, la fuerza aplicada y la carga o resistencia (Figura 1). Las palancas de clase 1 tienen un fulcro central con la fuerza aplicada en un lado y la carga en el otro (ej., subibaja). Para las palancas de clase 2, la carga es central y la fuerza y el fulcro están en lados opuestos (ej., una carretilla). Para las palancas de clase 3, la fuerza se aplica centralmente y el fulcro y la carga están en extremos opuestos del brazo (ej. un par de pinzas es un par de palancas de tercera clase).

        Figura 1 The three classes of levers — class 1 (a), class 2 (b), and class 3 (c) — with corresponding examples in the human body. Shown are the relative positions of the fulcrum (F), resistance (R), and effort (E) or force applied in each case. Image credit: “Lever Systems of the Human Body” by Daniel Donnelly, CC BY 4.0, Retrieved from https://www.flickr.com/photos/187096960@N06/51172431376

         

        En el cuerpo humano, los huesos actúan como brazos de palanca y las articulaciones como fulcros. La fuerza para superar una resistencia o levantar una carga es proporcionada por la contracción de músculos esqueléticos, que están unidos a los huesos por tendones [Open Learning Initiative, 2016, Guyton and Hall, 2016, Betts et al., 2013]. Las tres clases de palancas sí se encuentran en el cuerpo humano, aunque algunas son más comunes que otras. Las palancas de clase 1 son raras, pero existen algunos ejemplos, incluyendo el sistema hueso-articulación responsable de la flexión y extensión de la cabeza (bajar o levantar la cabeza, respectivamente; Figura 1a). En este caso, el fulcro es la articulación entre el cráneo y la primera vértebra cervical. La carga, o resistencia, es el peso de la cabeza misma. La fuerza para levantar la cabeza es aplicada por la contracción de músculos esqueléticos en el cuello y la parte superior de la espalda, incluyendo el esplenio de la cabeza y semiespinal de la cabeza [Betts et al., 2013]. El brazo de palanca en este caso no es tan obvio como en los sistemas de huesos largos, pero es el cráneo mismo. Se puede imaginar una línea que va diagonalmente desde los músculos del cuello en la izquierda, hacia arriba a través de la articulación cervical, y termina en un punto del cráneo arriba de la cuenca del ojo.

        Cuando una persona se pone de puntillas, podemos observar un ejemplo de palanca de clase 2 en el cuerpo humano (Figura 1b). El pie es el brazo de palanca, las articulaciones entre los huesos del pie y los de los dedos —las articulaciones metatarsofalángicas [Betts et al., 2013]— actúan como punto de apoyo, y la carga es el peso corporal de la persona [Open Learning Initiative, 2016]. La fuerza necesaria para levantar el cuerpo se obtiene mediante la contracción de los músculos gastrocnemio (comúnmente llamados gemelos) y sóleo de la pantorrilla [Betts et al., 2013].

        Las palancas de clase 3 son el tipo más observado en el cuerpo humano [Open Learning Initiative, 2016]. El ejemplo clásico es el complejo formado por el bíceps braquial, el codo y el antebrazo (Figura 1c). En este ejemplo, el antebrazo es el brazo de palanca, la articulación del codo es el fulcro, y la fuerza requerida para mover el brazo hacia arriba (flexionar) o levantar una carga es proporcionada por el bíceps.

        Estructura del músculo esquelético

        Para entender cómo se contraen los músculos, primero debemos conocer su estructura. Los músculos esqueléticos están compuestos por múltiples fascículos, que son haces de muchas fibras musculares más pequeñas rodeadas por una capa de tejido conectivo (Figura 2). Cada fibra muscular está compuesta a su vez por muchas miofibrillas más pequeñas, que contienen la maquinaria molecular que permite la contracción [Guyton and Hall, 2016, Betts et al., 2013]. En muchos músculos esqueléticos, los fascículos se disponen en paralelo, extendiéndose a lo largo de la longitud del músculo. Otros músculos muestran un arreglo circular de fascículos. Algunos músculos tienen fascículos que se encuentran en un punto de inserción (convergente), mientras que otros se extienden desde un tendón central (penniforme). El arreglo de los fascículos afecta la dirección y el ángulo en el que las fibras pueden tirar, y también afecta la generación de fuerza en el músculo [Betts et al., 2013].

        Figura 2 Estructura muscular y niveles de organización. La imagen superior muestra los fascículos musculares. La imagen del medio amplía un fascículo para mostrar las fibras musculares. La imagen inferior muestra el detalle en una fibra muscular para evidenciar las miofibrillas. Imagen: OpenStax, CC BY 4.0 https://openstax.org/books/anatomy-and-physiology/pages/10-2-skeletal-muscle

        Rodeando a la fibra muscular está la membrana plasmática, o sarcolema. En el sarcolema están incrustadas proteínas transmembrana, como canales iónicos que median corrientes y permiten la generación de potenciales de acción (PA) musculares. Estos PA se propagan a través de invaginaciones en el sarcolema, conocidas como túbulos transversos (T) (Figura 3). Posicionado justo al lado de los túbulos T está el retículo sarcoplasmático, el equivalente del retículo endoplasmático en el músculo. Aquí, canales específicos responden a los cambios en voltaje generados por los PA que se propagan para iniciar eventos intracelulares que activan la maquinaria contráctil [Guyton and Hall, 2016, Betts et al., 2013].

         

        Figura 3 Las invaginaciones en el sarcolema forman los túbulos T, que corren por las miofibrillas y están flanqueados por retículo sarcoplasmático (RS) en ambos lados. Derecha: Cerca del RS, las proteínas están organizadas en sarcómeros, la unidad contráctil del músculo. Imagen: Adaptado de imágenes de OpenStax, CC BY 4.0 https://openstax.org/books/anatomy-and-physiology/pages/10-2-skeletal-muscle.

         

        La unidad contráctil funcional del músculo esquelético se conoce como sarcómero. En los músculos esqueléticos, los sarcómeros están organizados en serie a lo largo de la longitud de las miofibrillas. Los cambios regulares y repetidos en la densidad de proteínas particulares en los sarcómeros es lo que da a los músculos esqueléticos su apariencia rayada, o estriada, microscópicamente [Rall, 2018].

        Modelo de filamentos deslizantes y relación longitud-tensión

        Los sarcómeros contienen diversas proteínas, como la titina, que actúa como un «resorte molecular» y es importante para establecer la elasticidad y la tensión pasiva en los músculos [Granzier and Labeit, 2006]. Sin embargo, la base de la contracción reside en la interacción entre los filamentos de actina (finos) y los filamentos de miosina (gruesos) [Guyton and Hall, 2016, Betts et al., 2013]. Estos filamentos se disponen en paralelo, con áreas de superposición. La miosina puede unirse a la actina a través de sitios de unión en la región de la cabeza de miosina, formando lo que se denomina un puente cruzado. Cuando la cabeza se mueve, los filamentos se deslizan uno sobre el otro, aumentando el área de superposición y acortando el sarcómero (Figura 4).

        Figura 4 Modelo de filamento deslizante de contracción muscular. La imagen superior muestra el sarcómero en el músculo relajado. Los filamentos presentan zonas de superposición, pero no están activamente conectados. La imagen inferior muestra el sarcómero en el músculo contraído. Las cabezas de miosina se unen a los filamentos de actina, desplazándose hacia la línea M, y se deslizan para acortar el sarcómero. Imagen: Richfield, David (2014). “Galería médica de David Richfield”. WikiJournal of Medicine 1 (2). DOI:10.15347/wjm/2014.009. ISSN 2002-4436.

         

        Cuando esto ocurre en múltiples sarcómeros a lo largo de la miofibrilla, esta se acorta. Si el mismo efecto ocurre en muchas miofibrillas dentro de muchos fascículos, todo el músculo se acorta y produce una contracción. Esta descripción de la interacción entre los filamentos de miosina y actina se denomina modelo de filamento deslizante de contracción [Guyton and Hall, 2016, Betts et al., 2013]. Los pasos mediante los cuales los filamentos de miosina y actina se enganchan, deslizan, separan y luego se restablecen se denominan en conjunto ciclo de puentes cruzados (tratado con más detalle a continuación).

        Existe un nivel intermedio óptimo de superposición de filamentos que produce una tensión máxima en el músculo [Guyton and Hall, 2016, Betts et al., 2013]. Muy poca superposición y los filamentos no pueden unirse ni interactuar; demasiada superposición y no hay capacidad para que se deslicen adicionalmente. La relación entre la superposición de filamentos (es decir, la longitud del sarcómero) y la tensión muscular se llama relación longitud-tensión, y se muestra en Figura 5.


        Figura 5 Relación longitud-tensión en músculo. Se produce una tensión máxima cuando los filamentos de actina y miosina tienen una superposición óptima para deslizarse, es decir, alrededor del 80-100% de la longitud de reposo del sarcómero. Imagen: OpenStax, CC BY, https://openstax.org/books/anatomy-and-physiology/pages
        /10-4-nervous-system-control-of-muscle-tension

        Acoplamiento excitación-contracción y ciclo de puentes cruzados

        ¿Cómo es que un PA generado en la unión neuromuscular (UNM) (la generación del PA en la UNM no se aborda aquí, pero puede revisarse en el Cap. 7 de Guyton & Hall) conduce al ciclo de puentes cruzados dentro de los sarcómeros? En otras palabras, ¿cómo se acopla la excitación a la contracción? El PA se propaga desde la UNM a través de los túbulos T para alcanzar el interior de las miofibrillas [Guyton and Hall, 2016, Betts et al., 2013]. Dentro del túbulo T, el cambio de voltaje activa un canal de calcio dependiente de voltaje conocido como Cav1.1, o receptor de dihidropiridina (DHPR) [Schneider and Hernández-Ochoa, 2012]. El DHPR está mecánicamente vinculado al receptor de rianodina (RyR) incrustado en la membrana del retículo sarcoplásmico (RS). La activación del DHPR provoca un cambio conformacional que, a su vez, activa al RyR, abriendo el canal y permitiendo que el calcio salga del RS a favor de su gradiente electroquímico. Este aumento de calcio intracelular libre, a su vez, permite la formación de puentes cruzados. Si no hay calcio presente, no se pueden formar los puentes cruzados porque un complejo de proteínas de tropomiosina y troponina bloquea el sitio de unión a la miosina en los filamentos de actina. Cuando el calcio se une a la troponina, produce un cambio conformacional que desplaza a la tropomiosina y permite la unión entre miosina y actina. Una vez que están unidos, los filamentos pueden deslizarse [Betts et al., 2013, Schneider and Hernández-Ochoa, 2012].

        Para continuar el ciclo, los filamentos de miosina y actina también deben poder separarse y restablecer su posición. Este proceso requiere energía en forma de ATP [Guyton and Hall, 2016, Betts et al., 2013]. Cuando la miosina se une al ATP, se desprende de la actina. Posteriormente, el ATP se hidroliza y la energía liberada se utiliza para mover la cabeza de miosina de regreso a la posición “cargada”, lista para unirse nuevamente a la actina. El ADP y un fosfato inorgánico permanecen unidos a la cabeza de miosina. Luego, la miosina se une a la actina y libera el fosfato inorgánico. A continuación, la cabeza de miosina libera el ADP y se mueve hacia el interior en lo que se llama golpe de fuerza, lo que provoca que los filamentos de actina se deslicen hacia la línea media y acorten el sarcómero. El ciclo de puentes cruzados continúa mientras haya suficiente ATP y calcio presentes. El músculo se relaja cuando el calcio es bombeado de nuevo al RS y ya no está disponible, lo que permite que la tropomiosina vuelva a bloquear el sitio de unión actina-miosina [Guyton and Hall, 2016, Betts et al., 2013].

        Pregunta de estudio: ¿En qué se diferencian los detalles moleculares del acoplamiento excitación-contracción en el músculo cardíaco y el músculo liso, en comparación con el músculo esquelético?

        Respuestas de las fibras musculares, sumación y reclutamiento

        La respuesta de un músculo a la estimulación depende del momento y la intensidad del estímulo [Betts et al., 2013, Schneider and Hernández-Ochoa, 2012]. Si solo ocurre un estímulo breve, la fibra muscular responderá con un único PA y se producirá sólo una contracción breve (de decenas a cientos de milisegundos). Debido a que los eventos intracelulares necesarios para producir una contracción tardan más que los que generan un PA, puede llegar otro PA antes de que la fibra muscular se haya relajado por completo. Si esto ocurre, la segunda respuesta se sumará a la tensión ya presente en el músculo, en un proceso llamado sumación. Para lograr una contracción sostenida de la fibra muscular y generar una tensión lo suficientemente grande como para realizar trabajo, se requiere la sumación de múltiples eventos estimulantes [Guyton and Hall, 2016, Schneider and Hernández-Ochoa, 2012].

        Además de la sumación dentro de fibras musculares individuales, se activan múltiples fibras para lograr la contracción del músculo completo. Una neurona motora y todas las fibras musculares a las que envía señales (inerva) dentro de un músculo se llama unidad motora. Las unidades motoras pueden variar en tamaño, algunas neuronas motoras inervan pocas fibras (unidad pequeña) y otras inervan muchas (unidad grande). Los músculos pueden variar la fuerza que generan dependiendo del número y tipo de unidades motoras que se reclutan [Betts et al., 2013].

         

        Figura 6 Respuestas musculares. Izquierda: Miograma que muestra la tensión desarrollada durante una contracción breve de una fibra muscular producida por un solo estímulo breve. Derecha: Estímulos múltiples aplicados en rápida sucesión producen sumación y aumento de la tensión. Si la frecuencia de estimulación es lo suficientemente alta, las respuestas se fusionan en un tétanos. Se logra una tensión máxima y una contracción continua. Imagen: Open Stax, CC BY, https://openstax.org/books/anatomy-and-physiology/pages/10-4-nervous-system-control-of-muscle-tension

        Medición de la actividad eléctrica de los músculos esqueléticos – electromiograma

        Para registrar la actividad eléctrica de los músculos se utiliza una técnica llamada electromiografía, y las grabaciones obtenidas se denominan electromiogramas [Cavalcanti Garcia and Vieira, 2011]. (Usamos ‘EMG’ para referirnos a la técnica y/o al registro dependiendo del contexto.) El registro se puede realizar de forma invasiva, insertando electrodos en el músculo de interés, o de forma no invasiva, utilizando electrodos de superficie, colocados sobre la piel que recubre el músculo. Insertar los electrodos permite obtener grabaciones de EMG más limpias, donde puede distinguirse la actividad de unidades motoras individuales. Sin embargo, la inserción puede ser dolorosa y requiere condiciones estériles para evitar infecciones, por lo que no es ideal para contextos educativos. En cambio, los electrodos de superficie pueden colocarse y retirarse fácilmente sin causar daño. Las limitaciones de este tipo de registro extracelular incluyen que solo puede medirse la actividad de músculos superficiales y que no siempre es posible distinguir unidades motoras individuales [Cavalcanti Garcia and Vieira, 2011]. Estas limitaciones no son prohibitivas y suelen compensarse con los beneficios de la no invasividad, aunque deben tenerse en cuenta al decidir dónde colocar los electrodos y cómo analizar los datos.

        Una de las configuraciones de registro más comunes se denomina EMG bipolar, o EMG diferencial simple [Cavalcanti Garcia and Vieira, 2011]. Para realizarla se colocan dos electrodos de superficie sobre la piel, encima del músculo de interés, separados solo por unos pocos centímetros Figura 7. Al restar las señales registradas en ambos puntos y amplificar la diferencia, se excluyen en gran medida las señales comunes que podrían provenir de otros músculos fuera del área de registro, registrándose principalmente cambios locales en la actividad eléctrica. Esta configuración reduce la interferencia entre músculos [Cavalcanti Garcia and Vieira, 2011].

        Figura 7 Configuración de registro EMG bipolar. Por simplicidad, no se muestran todos los componentes del cuerpo ni del sistema de registro. Crédito de la imagen: Erin C. McKiernan, CC BY, basado en una figura de [Cavalcanti Garcia and Vieira, 2011].

         

        Los EMG bipolares de superficie pueden informarnos sobre varios aspectos de la actividad muscular [Cavalcanti Garcia and Vieira, 2011]. Uno de ellos es el momento en que se activa o relaja el músculo. La mayoría de los músculos muestran muy poca actividad en reposo. Cuando se activan, se observa un aumento notable en la aparición de impulsos eléctricos, como se muestra en la Figura 7, lado derecho. Cuando el músculo se relaja, estos impulsos desaparecen y solo se registra el ruido de base. También podemos estimar, hasta cierto punto, la fuerza o el esfuerzo ejercido durante una contracción. A medida que el sujeto aumenta la fuerza de la contracción, se observa un aumento tanto en la frecuencia de los impulsos eléctricos como en la amplitud de la señal. Estos cambios se deben a dos factores: (1) una mayor frecuencia de disparo en las unidades motoras ya activas, y (2) el reclutamiento de unidades motoras adicionales. Recuerda que se está registrando la actividad de múltiples unidades motoras. Con una mayor fuerza de contracción, se reclutan más unidades motoras que comienzan a activarse, y su actividad se suma, contribuyendo al aumento de frecuencia y amplitud.

        1. Actividades en clase

        Actividad 1. Preguntas de estudio

        1. ¿Dónde deberás colocar los electrodos para registrar EMGs de un sistema de palanca de clase 1, clase 2 o clase 3?
        2. ¿Podrás registrar desde cualquier músculo que desees en cada sistema de palanca? ¿Por qué sí o por qué no?
        3. ¿Cómo sabrás si colocaste correctamente los electrodos? ¿Qué podrías hacer para verificarlo?

        Actividad 2. Protocolo experimental para electromiografía

        Equipo y materiales

        • Muscle SpikerBox (Backyard Brains)
        • Batería de 9V para alimentar el SpikerBox
        • Electrodos de superficie redondos (cualquier proveedor de suministros médicos)
        • Cable con pinzas cocodrilo para conectar electrodos al SpikerBox (Backyard Brains)
        • Cable para conectar SpikerBox a una computadora, tableta o teléfono (Backyard Brains)
        • Computadora, tableta o teléfono con el software gratuito Spike Recorder instalado
        • Adaptador para teléfono o tableta, de aux 3.5mm a USB-C (si no hay puerto aux en los dispositivos; cualquier proveedor)
        • Alcohol y hisopos de algodón para quitar electrodos después del registro (opcional)

         

        Otras indicaciones: Usar ropa holgada para permitir la colocación de electrodos

        Antes de comenzar, asegúrate de tener todo el equipo necesario y de haber instalado el software Spike Recorder en tu computadora o teléfono. Los siguientes pasos te guiarán para configurar el equipo y realizar las grabaciones.

        Configura las grabaciones de EMG

        La Muscle SpikerBox de Backyard Brains viene completamente ensamblada y casi lista para grabar. Solo tienes que conectar la batería, los cables y los electrodos.

        1. Conecta la batería de 9V a sus terminales en la Muscle SpikerBox
        2. Conecta el cable negro/azul o verde al puerto correspondiente en la Muscle SpikerBox para computadora, tableta o teléfono; ten en cuenta que el cable para smartphone es direccional y está etiquetado, así que asegúrate de insertar el extremo correcto en el dispositivo
        3. Conecta el otro extremo del cable negro/azul o verde a tu computadora, tableta o teléfono
        4. Conecta el cable naranja a su puerto correspondiente en la Muscle SpikerBox
        5. Coloca los electrodos de superficie sobre el músculo de interés, separados por solo unos centímetros y orientados en paralelo a las fibras musculares; recuerda que para registrar cada tipo de palanca, deberás cambiar la colocación de los electrodos entre experimentos
        • Palanca de clase 1 – músculo de interés: splenius capitis
        • Palanca de clase 2 – músculo de interés: gastrocnemio
        • Palanca de clase 3 – músculo de interés: bíceps braquial
        1. Conecta cada una de las pinzas tipo cocodrilo rojas del extremo del cable naranja a uno de los electrodos de superficie; asegúrate de que las partes metálicas no se toquen entre sí y trata de evitar que los cables se enreden
        2. Sostén la pinza negra tipo cocodrilo (referencia) en tu mano, o conéctala a otro electrodo de superficie en el dorso de la mano o alguna otra zona alejada del sitio de registro, por ejemplo sobre un hueso
        3. Para mejorar la señal de EMG, puede limpiarse con alcohol la zona donde se colocarán los electrodos; espera a que se seque completamente antes de colocarlos
        4. Puede usarse gel para electrodos para mejorar la conducción, aunque no suele ser necesario, especialmente si los electrodos tienen un adhesivo fuerte que asegure buen contacto con la piel; la mayoría de los electrodos estándar tiene un buen pegamento y se recomienda no usar gel
        5. Para evitar artefactos de ruido, asegúrate de que ninguna prenda toque los electrodos o esté rozando los cables durante la grabación

        Figura 8 Izquierda: Configuración del EMG con electrodos conectados a la Muscle SpikerBox. (La conexión con computadora o teléfono no se muestra.) Imagen: Backyard Brains, CC BY NC. Fuente: https://backyardbrains.com/products/muscle-spikerbox

        Prueba las grabaciones de EMG

        1. Enciende la Muscle SpikerBox girando la rueda negra en el lateral; debería encenderse una luz verde. Nota: los electrodos deben estar conectados antes de encender el dispositivo y deben desconectarse solo después de apagarlo para evitar un molesto ruido.
        2. Abre el software Spiker Recorder y explora los controles y configuraciones; para más información sobre el uso del software, consulta [Lazarevic, 2020]
        3. Chasquea los dedos cerca del dispositivo de grabación; si ves un artefacto correspondiente en la pantalla, significa que solo estás grabando audio. Para comenzar a registrar actividad muscular, ajusta la configuración presionando el botón ‘Config’ y conectate al puerto indicado.
        4. Pídele al sujeto experimental que contraiga y relaje brevemente el músculo de interés, y verifica que se observan potenciales eléctricos durante la contracción.
        5. Revisa la relación señal-ruido; si la señal es muy débil, ajusta la ganancia o amplificación girando la rueda hacia la derecha.
        6. Intenta guardar una grabación en tu computadora o teléfono; el formato será .wav y usualmente se guarda en una carpeta de música u otra donde se almacenan archivos de audio. (Nota: Algunos dispositivos no permiten la grabación, funciona mejor con iPhone, algunos de Android con sistema operativo antiguo, algunas computadoras como Mac)

        Figura 9 Interfaz del software de grabación. Imagen: Backyard Brains, CC BY NC. https://help.backyardbrains.com/support/solutions/articles/43000607420-spike-recorder-for-pc-mac-linux

        Recolectar datos de EMG

        1. Asegúrate de que el dispositivo esté listo para grabar y que la persona voluntaria esté en posición de reposo.
        2. Antes de comenzar la grabación, pídele a la persona voluntaria que piense en el tipo de movimiento que debe hacer para activar el músculo de interés. Por ejemplo, para el gastrocnemio, esto implica pararse de puntillas; para el splenius capitis, levantar la cabeza.
        3. Cuando la persona esté lista, presiona ‘record’ en la interfaz del Spike Recorder
        4. Indícale que permanezca relajada durante unos segundos después de comenzar la grabación, luego que contraiga el músculo de interés por unos segundos, y que después lo relaje nuevamente por unos segundos.
        5. Pídele que repita la secuencia anterior al menos 3 veces para poder obtener diferentes mediciones.
        6. Termina la grabación y guarda los datos en tu computadora, tableta o teléfono; las grabaciones deben guardarse y exportarse en formato .wav para su análisis.
        7. Inicia una nueva grabación para examinar los efectos de la fuerza de contracción en la señal EMG.
        8. Indica a la persona que realice una primera contracción con muy poca fuerza, luego haga una pausa; después una segunda contracción con mayor fuerza, pausa nuevamente; y finalmente una tercera contracción con fuerza máxima.
        9. Termina las grabaciones y guarda los datos en tu computadora o teléfono.
        10. Inicia una nueva grabación para examinar los efectos de distintas actividades físicas y de la fatiga sobre la señal EMG.
        11. Indica a la persona que contraiga el músculo de interés y mantenga la contracción el mayor tiempo posible. ¿Cuánto tiempo puede mantenerla? ¿Qué ocurre al comenzar a fatigarse? ¿Qué diferencias observas entre fuerza mínima y fuerza máxima?
        12. Termina la grabación y guarda los datos en tu computadora, tableta o teléfono.
        13. Repite lo anterior para cada músculo correspondiente a los tres tipos de sistema de palancas; las personas deben descansar unos minutos entre grabaciones.
        14. Recuerda etiquetar tus datos para saber a qué persona, músculo y tipo de experimento pertenece cada grabación.
        15. Si no funciona la grabación en sus dispositivos, se puede grabar la pantalla (solo que no se puede realizar análisis cuantitativo después); si no les interesa analizar los datos después se puede simplemente registrar y hacer observaciones y conclusiones cualitativos durante la práctica.
        16. Realiza contracciones isotónicas, isométricas y con dinamómetro para poder evaluar si la señal se relaciona con la actividad que observar en el registro como se sugiere a continuación.

        Actividades para evaluar la señal de EMG

        1. Registrar el músculo masetero al masticar chicle u otros alimentos. También intente abrir y cerrar pasivamente la boca y sonreír para comparar la activación del músculo con diferentes movimientos. Recuerde colocar los electrodos de registro en paralelo a las fibras musculares, es decir, casi verticales o en una ligera diagonal según la posición del músculo masetero que se siente al apretar la mandíbula. El electrodo de tierra/referencia se coloca detrás de la oreja, sobre el proceso mastoideo. Se recomienda utilizar electrodos de ECG pediátricos para esta grabación, ya que son más pequeños y mejores para registrar los músculos faciales que los electrodos estándar más grandes.
        2. Registrar el segundo músculo interóseo dorsal durante la abducción del dedo índice. Intente también levantar el dedo o moverlo lateralmente de forma pasiva con la ayuda de otro dedo para comparar la actividad muscular. Coloque los dos electrodos de registro en el espacio entre el segundo y el tercer dígito. El electrodo de tierra/referencia se coloca en el dorso de la mano. Los músculos más pequeños de la mano requieren electrodos más pequeños, como electrodos de lengüeta cuadrada que se pueden cortar en tiras o cuadrados, conservando la lengüeta donde se fijan las pinzas de cocodrilo.

        1. Registrar los bíceps de dos voluntarios y compárelos durante diferentes actividades, como lucha de brazos o levantamiento de pesas (ej., mochilas cargadas de libros). Esto requerirá dos dispositivos de grabación o un dispositivo con dos canales. Pregunte a los estudiantes cómo podrían comparar los registros, dado que dos sujetos pueden tener una actividad de base y una amplitud de registro muy diferentes.

         

         

        1. Registrar los bíceps de dos voluntarios y compárelos mientras se sostiene un dinamómetro y observe el cambio en la señal. Durante esta actividad le pediremos al voluntario que apriete con fuerza el dinamómetro Jamar que se muestra aquí y registraremos la fuerza que está realizando, para relacionarlo con la amplitud de la señal eléctrica de EMG.

         

        Referencias

        [1] Open Learning Initiative. Levers and Movement. Carnegie Mellon University, 2016. URL: https://oli.cmu.edu/jcourse/workbook/activity/page?context=df3c7cac0a0001dc63b5a789a1529c51.

        [2] A.C. Guyton and J.E. Hall. Textbook of Medical Physiology. Elsevier Saunders, Philadelphia, Pennsylvania, USA, 13 edition, 2016.

        [3] J.G. Betts, K.A. Young, J.A. Wise, E. Johnson, B. Poe, D.H. Kruse, O. Korol, J.E. Johnson, M. Womble, and P. DeSaix. Interactions of Skeletal Muscles, Their Fascicle Arrangement, and Their Lever Systems. OpenStax, 2013. URL: https://openstax.org/books/anatomy-and-physiology/pages/11-3-axial-muscles-of-the-head-neck-and-back.

        [4] J.G. Betts, K.A. Young, J.A. Wise, E. Johnson, B. Poe, D.H. Kruse, O. Korol, J.E. Johnson, M. Womble, and P. DeSaix. Axial Muscles of the Head, Neck, and Back. OpenStax, 2013. URL: https://openstax.org/books/anatomy-and-physiology/pages/11-3-axial-muscles-of-the-head-neck-and-back.

        [5] J.G. Betts, K.A. Young, J.A. Wise, E. Johnson, B. Poe, D.H. Kruse, O. Korol, J.E. Johnson, M. Womble, and P. DeSaix. Bones of the Lower Limb. OpenStax, 2013. URL: https://openstax.org/books/anatomy-and-physiology/pages/8-4-bones-of-the-lower-limb.

        [6] J.G. Betts, K.A. Young, J.A. Wise, E. Johnson, B. Poe, D.H. Kruse, O. Korol, J.E. Johnson, M. Womble, and P. DeSaix. Appendicular Muscles of the Pelvic Girdle and Lower Limbs. OpenStax, 2013. URL: https://openstax.org/books/anatomy-and-physiology/pages/11-6-appendicular-muscles-of-the-pelvic-girdle-and-lower-limbs.

        [7] J.G. Betts, K.A. Young, J.A. Wise, E. Johnson, B. Poe, D.H. Kruse, O. Korol, J.E. Johnson, M. Womble, and P. DeSaix. Skeletal Muscle. OpenStax, 2013. URL: https://openstax.org/books/anatomy-and-physiology/pages/10-2-skeletal-muscle.

        [8] Jack A. Rall. What makes skeletal muscle striated? Discoveries in the endosarcomeric and exosarcomeric cytoskeleton. Advances in Physiology Education, 42(4):672–684, dec 1 2018. URL: http://dx.doi.org/10.1152/advan.00152.2018, doi:10.1152/advan.00152.2018.

        [9] H.L. Granzier and S. Labeit. The giant muscle protein titin is an adjustable molecular spring. Exercise and Sport Sciences Reviews, 34(2):50–53, 2006.

        [10] J.G. Betts, K.A. Young, J.A. Wise, E. Johnson, B. Poe, D.H. Kruse, O. Korol, J.E. Johnson, M. Womble, and P. DeSaix. Muscle Fiber Contraction and Relaxation. OpenStax, 2013. URL: https://openstax.org/books/anatomy-and-physiology/pages/10-3-muscle-fiber-contraction-and-relaxation.

        [11] J.G. Betts, K.A. Young, J.A. Wise, E. Johnson, B. Poe, D.H. Kruse, O. Korol, J.E. Johnson, M. Womble, and P. DeSaix. Nervous System Control of Muscle Tension. OpenStax, 2013. URL: https://openstax.org/books/anatomy-and-physiology/pages/10-4-nervous-system-control-of-muscle-tension.

        [12] M.F. Schneider and E.O. Hernández-Ochoa. Skeletal Muscle Excitation–Contraction Coupling, pages 811–821. Volume 2. Elsevier, 2012.

        [13] M.A. Cavalcanti Garcia and T.M.M. Vieira. Surface electromyography: why, when and how to use it. Revista Andaluza de Medicina del Deporte, 4(1):17–28, 2011. URL: https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=323327665004.

        [14] John Lazarevic. Spike Recorder for PC/Mac/Linux. Backyard Brains Docs, 2020. URL: https://help.backyardbrains.com/support/solutions/articles/43000607420-spike-recorder-for-pc-mac-linux.

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          Biofísica de la membrana celular. Potencial de membrana en reposo y potencial de acción

          Biofísica de la membrana celular. Potencial de membrana en reposo y potencial de acción

          Objetivos de aprendizaje

          • Discutir como los cambios de concentración y permeabilidad iónica afectan el potencial de membrana en reposo mediante el uso de un simulador.
          • Coordinar el análisis y la resolución de viñetas clínicas relacionadas con el potencial de membrana y el potencial de acción a través de la discusión grupal.

          Resultado de aprendizaje

          • Integra el concepto de potencial de equilibrio, potencial de membrana en reposo y potencial de acción mediante un software de ecuaciones Nernst/Goldman.
          • Analiza como los cambios en la concentración y la permeabilidad iónica afectan el potencial de equilibrio, el potencial de membrana y el potencial de acción en situaciones clínicas.

          Glosario de términos

          Conductancia (G): Propiedad de la membrana celular que representa la facilidad con la que los iones pasan o atraviesan un segmento de la membrana celular.

          Constante de longitud: Indica que distancia tendremos que alejarnos del sitio de máximo voltaje para encontrar que la señal decae hasta el 37% de su valor (figura 1 glosario).

          Constante de tiempo: Indica el tiempo que una célula tarda en descargarse hasta el 37% del valor máximo que se alcanza cuando aplicamos un pulso de corriente (figura 1 glosario).

          Figura 1 glosario. Se muestra la carga o despolarización de la membrana celular (izquierda) así como el decaimiento de esta desde el 100%, al 37 % y luego al 1%. Cuando la señal decae al 37% en función del tiempo, es constante de tiempo y cuando lo hace en función de la distancia, es constante de longitud.

          Despolarización: Es el proceso mediante el cual una célula excitable cambia su potencial eléctrico, de negativo a positivo mediante el intercambio de iones y puede llegar a generar un potencial de acción.

          Ecuación de Nernst: Ecuación utilizada para calcular el potencial de equilibrio de un ion que se encuentre en ambos lados de una membrana permeable para él

          Ecuación de Goldman-Hodgkin-Katz: Ecuación utilizada para calcular el potencial de membrana al interior de una célula permeable a Na+, K+ y Cl-.

          Equilibrio de Gibbs-Donnan: Se designa así al equilibrio que se produce entre los iones que pueden atravesar la membrana y los que no son capaces de hacerlo.

          Ley de Ohm: Es la forma de calcular la relación entre voltaje, corriente y resistencia en un circuito eléctrico. La fórmula es: V = I x R, donde: V = voltaje, I = corriente, R = resistencia.

          mM: Milimolar, es una medida de concentración de un soluto en una disolución (10-3 molar).

          mV: milivoltios, es la unidad de medida de la tensión eléctrica equivalente a la milésima parte de un voltio.

          nM: NanoMolar, es una medida de concentración de un soluto en una disolución (10-9 molar).

          Período refractario absoluto: Intervalo de tiempo que ocurre después de que la membrana alcanza su nivel umbral y se lleva a cabo el potencial de acción, en este periodo es imposible excitar a la célula independientemente de la corriente de estimulación que se le aplique.

          Período refractario relativo: Intervalo de tiempo que ocurre posterior al periodo refractario absoluto, en la cual es posible desencadenar el potencial de acción, pero se necesita de la aplicación de estímulos más grandes que los requeridos normalmente para alcanzar el umbral.

          Potencial de acción: Impulso eléctrico transitorio y regenerativo en el cual el potencial de membrana aumenta rápidamente volviéndolo más positivo comparado con su estado de reposo.

          Potencial de equilibrio para un ion: Diferencia del potencial eléctrico a través de la membrana celular que equilibra exactamente el gradiente de concentración de un ion.

          Potencial de membrana en reposo: Diferencia de voltaje a través de la membrana, generado por la permeabilidad y la diferencia de concentraciones de ciertos iones en una célula que no se encuentra activa.

          Umbral: Punto crítico o limite en el que un estímulo alcanza una magnitud suficiente para desencadenar una respuesta.

          Voltaje: Magnitud que establece la diferencia del potencial eléctrico entre dos puntos.

          1. Introducción

           Potencial de equilibrio

          Toda célula está delimitada por una membrana plasmática formada por una bicapa de lípidos, lo que le confiere un carácter hidrofóbico. No obstante, la membrana es semipermeable a una amplia variedad de moléculas, lo que resulta en una diferencia en la composición del citoplasma y el medio extracelular. De entre todas las moléculas, los iones resultan ser de vital importancia para múltiples funciones celulares. Los más abundantes son el Na+, K+, Ca2+ y Cl, cuyos valores fisiológicos en el humano se indican en la tabla 1.

          Tabla 1. Concentraciones típicas de los principales iones en el medio intracelular y extracelular en humanos. (Hille B, 1992)

           

          Esta diferencia en las concentraciones iónicas condiciona una diferencia entre las cargas a ambos lados de la membrana, las mismas que tratarán de igualarse (equilibrio de Gibbs-Donnan). Bajo ciertas condiciones, la membrana permite el paso de algunos iones, lo que genera un flujo de cargas que depende de la permeabilidad relativa de la membrana a cada ion. Al pasar los iones a favor de su gradiente de concentración (de donde hay más a donde hay menos) se genera una diferencia de potencial eléctrico a través de la membrana, llamado potencial de membrana (medida en milivoltios o mV). Es de crucial importancia comprender que dicho potencial de membrana será determinado solo por las concentraciones iónicas a cada lado de la membrana y por la permeabilidad de la misma membrana a cada ion.  

          Antes de entender cómo se genera el potencial de la membrana, debemos comprender lo que es el potencial de equilibrio. En la figura 1 vemos dos momentos: 1) estado de inicio y 2) en equilibrio. En el estadio inicial, tenemos dos compartimentos, adentro y afuera de la célula, y podemos ver que afuera de la célula hay mucho Na+ y Cl, en este caso, la membrana es IMPERMEABLE al Cl pero PERMEABLE al Na+, porque existen canales de Na+ que permitirán que éste difunda hacia adentro de la célula (a favor del gradiente de concentración). Y así el Na+, comenzará a difundir hacia adentro de la célula, pero llegará el momento en donde se detendrá su difusión porque las cargas del Cl se encuentran atrayendo al Na+ para que regrese al medio extracelular, en este momento el Na+ ha llegado a su POTENCIAL DE EQUILIBRIO.

          Figura 1. Se esquematiza el potencial de equilibrio para el Na+, logrado a través de la difusión de este por canales iónicos específicos y la fuerza quimioatrayente del Cl.

          Este equilibrio está descrito por la ecuación de Nernst, y se aplica para cada ion difusible a través de la membrana celular:

          Dónde:

          Ei= Es el potencial de equilibrio del ion X [V]

          R= constante de los gases (8.315 J K-1 mol-1)

          T = temperatura absoluta en grados Kelvin. Se calcula como 273.16 + °C

          A temperatura corporal de 37°C = 273.16 + 37 = 310.16 °K

          z = valencia del ion (-1) para aniones y (+1) para cationes monovalentes

          F = constante de Faraday (9.648 x 104 C mol-1)

          [ion]e = concentración extracelular del ion

          [ion]i = concentración intracelular del ion

           

          Potencial de membrana en reposo.

          Considerando que la membrana plasmática es principalmente permeable al K+, debido a la presencia de canales de fuga de K+ que permiten que éste salga de la célula cuando se encuentra en reposo, se puede simplificar el potencial de membrana en reposo como el potencial de equilibrio de K+. Usando la ecuación de Nernst, usando los valores que hemos visto en esta práctica, tenemos:

          El potencial de equilibrio para el K+ es -93 mV y a este voltaje se acercará el potencial de membrana en reposo. Sin embargo, el potencial de membrana en reposo de las células es diferente, ya que también las células también son permeable as a otros iones como el Na+ y Cl. Por esto usamos la ecuación de Goldman–Hodgkin–Katz:

          Donde Em es el potencial de membrana en reposo y P equivale a la permeabilidad relativa de la membrana a cada ion. Nótese que dado que el Cl tiene carga negativa, los valores de concentración intra- y extracelular cambian de lugar para poder usar el mismo valor de RT/zF. Considerando que la permeabilidad relativa respecto a K+ del Na+ es de 0.04 y de Cl es de 0.45, a temperatura corporal y las concentraciones indicadas en la tabla 1, el potencial de membrana en reposo es aproximadamente -70 mV. La permeabilidad de la membrana a los diferentes iones está dada por la existencia de proteínas transmembranales llamadas canales iónicos. Al abrirse, los canales iónicos permiten el paso selectivo de iones a favor de su gradiente electroquímico.

           

          Potencial de acción

          Algunos tipos de células tienen la capacidad de cambiar el potencial de membrana en reposo que es negativo, y generar potenciales positivos y transientes que conocemos como potenciales de acción. Los potenciales de acción son cambios estereotípicos, abruptos y transitorios en el potencial de membrana que ocurren en células excitables, llamadas así porque pueden responder ante la estimulación directa con una corriente eléctrica (por ejemplo, neuronas, células musculares y células endocrinas). Los potenciales de acción desempeñan un papel central en la comunicación de celular, siendo la base de la propagación de señales en neuronas y activando diversos procesos intracelulares como la contracción muscular y la liberación de insulina en las células beta del páncreas. Numerosos y brillantes científicos aportaron ideas novedosas que fueron consolidando la disciplina que hoy en día conocemos como electrofisiología. En la página ​http://www.facmed.unam.mx/historia/ se puede consultar un interesante recorrido por las ideas y descubrimientos que llevaron a nuestro entendimiento actual de la fisiología de las células excitables.

          El potencial de acción se debe a que existe un estímulo específico que abre canales de Na+ dependientes de voltaje, hasta que son tantos que el Na+ comienza a difundir desde afuera de la célula al interior, haciendo el citosol más positivo, es por ello por lo que el potencial de acción se acerca al potencial de equilibrio del Na+, porque con la apertura de estos canales, se aumenta su permeabilidad y el Na+ busca llegar a su equilibrio. El potencial de acción pasa por distintas fases dependiendo del tipo de célula excitable (Figura 2). En cada fase, la membrana celular cambia su permeabilidad abriendo y cerrando canales iónicos para que éstos fluyan, regresando al potencial de membrana en reposo al terminar estos cambios.

          Figura 2. Potencial de acción típico de una neurona. El potencial de acción en una neurona tiene tres fases, 1. Despolarización, 2. Repolarización, 3. Hiperpolarización. La fase de despolarización consta de un incremento rápido y homogéneo del potencial de membrana en reposo (-65 mV) hasta un valor positivo máximo (entre +10 a +40 mV), el fenómeno responsable de esta fase es el aumento en la conductancia de la membrana celular al Na. La fase de repolarización consta de un descenso desde el punto máximo de la despolarización y hasta el regreso al potencial de membrana en reposo. La fase de hiperpolarización puede dar lugar a un voltaje más negativo que el potencial de membrana en reposo. El fenómeno responsable de las fases de repolarización e hiperpolarización es el aumento en la conductancia de la membrana celular al potasio.

          Para iniciar el potencial de acción, se tiene que generar un estímulo que alcance el umbral y en ese momento se genere la fase de despolarización (canales de Na+ abiertos), llegando al sobretiro que es la parte más elevada del potencial (canales de Na+ inactivos), continuando la repolarización (canales de K+ abiertos), regresando al estado de reposo. El intervalo posterior al inicio de un potencial de acción en el que es imposible o resulta más difícil producir una segunda espiga se denomina período refractario.  El periodo refractario consta de dos fases, el periodo refractario absoluto y el relativo. El primero (absoluto) abarca desde el inicio del potencial de acción hasta casi el final de la repolarización, en esta fase es imposible desencadenar un segundo potencial de acción, independientemente de la intensidad o duración del estímulo aplicado. El periodo refractario relativo abarca el final de la repolarización y la hiperpolarización, en este, el estímulo necesario para que se lleve a cabo un nuevo potencial de acción deberá ser de mayor intensidad y duración que el estímulo que provoco el primer potencial de acción.

          1. Actividades en la sesión

          Actividad 1. Predicción de cambios en el potencial de membrana

          Materiales: Requieres una computadora por equipo de 3 personas con el programa ya descargado para la clase. Formula hipótesis en función de los cambios de concentraciones iónicas, temperatura y compruébalas en el software.

          Indicaciones para descargar el Software

          1) Descarga en tu computadora el programa Simulador de ecuaciones Nernst/Goldman, desarrollado por la Universidad de Arizona y disponible para Windows o Mac en el siguiente enlace (te recomendamos dar click en “Download Standlone Flash Version”):

          https://www.azps.life/home/2016/4/28/teaching-spotlight-nernstgoldman-simulator

          O puedes entrar a descargarlo desde el drive del departamento en:

          https://drive.google.com/file/d/1SRHf796wcYYI4cTveEK-BuCvYBl2_Y2s/view?usp=drive_link

          Recuerda que este paso debes hacerlo con anticipación porque te pediremos acceso para registrarte. Se descargará un archivo con terminación .zip/.exe.

          2) Se abrirá una pantalla inicial de la Universidad de Arizona y solo debes dar clic en el centro para ingresar al Software.

          En esta pantalla se pueden observar varios controles:

          Del lado izquierdo:

          a) Barras deslizables (rojas, azules y verdes) que permiten controlar las permeabilidades (Px, visibles cuando se selecciona la ecuación Goldman) y las concentraciones intra y extracelulares ([x]i y [x]0, respectivamente) de los iones potasio, sodio y cloro. b) Barra deslizable (amarilla) que permite controlar la temperatura.

          Del lado derecho:

          a) Pestañas superiores: permiten seleccionar si el simulador funciona con la ecuación de Nernst o la ecuación de Goldman, y si se da la opción a variar la temperatura o se toma un valor fijo de temperatura a 37 °C. b) Ecuación que se usa para correr la simulación con la pestaña seleccionada. c) Panel de en medio: gráfica que muestra el potencial de membrana en función del tiempo, con los parámetros estipulados. Nótese que se puede tener control de la escala en los ejes X y Y (con unidades en segundos y mV, respectivamente). También puede pausarse para observar con detenimiento los cambios. d) Panel inferior izquierdo: animación que ejemplifica la concentración de iones dentro y fuera de las células (no intenta demostrar el movimiento relativo de las partículas). e) Panel inferior derecho: muestra los valores calculados del potencial de equilibrio con las concentraciones y temperatura elegidos. f) Lista desplegable inferior: permite cambiar los valores predeterminados por los correspondientes a cuatro preparaciones experimentales típicas (célula genérica, músculo esquelético, axón de calamar y eritrocito).

           

          Desarrollo de la práctica:

          Formen equipos para resolver los siguientes problemas. Cada equipo con base en el conocimiento previo de la ecuación de Nernst y la generación del potencial de membrana hará una hipótesis de cómo se modificará el potencial de membrana en las siguientes condiciones:

          • Cuando la célula sólo es permeable al potasio, ¿qué pasará con el potencial si…?

          A) Duplicas las concentraciones de Na+ extracelular.

          B) Igualas la concentración intracelular y extracelular de K+.

          D) Disminuyendo la concentración de potasio extracelular.

          E) Disminuyendo la concentración de potasio intracelular.

          C) Aumentas la temperatura.

           

          • Cuando la célula es permeable al potasio, sodio y cloro, ¿qué pasará con el potencial si…?

           

          A) Aumentas las concentraciones de sodio extracelular al doble.

          B) Aumentas la permeabilidad al sodio.

          C) Aumentas la permeabilidad al potasio.

          D) Aumentas la permeabilidad al cloro.

          E) Aumentas la permeabilidad al sodio y al cloro simultáneamente.

            • Después de hacer una hipótesis para cada una de las preguntas previas, utilizarán el simulador en la modalidad Goldman para realizar experimentos en los que sistemáticamente se obtenga y grafique el valor de potencial de membrana en función de modificar:

            A) La concentración extracelular de cada uno de los iones.

            B) La concentración intracelular de cada uno de los iones.

            C) La temperatura.

            D) Las permeabilidades de los iones.

            Con los datos y gráficas obtenidas, contrasten los resultados obtenidos con sus hipótesis previas y hagan un reporte de práctica (se recomienda hacer un diagrama metodológico).

            Actividad 2. Viñetas clínicas

            Instrucciones: Antes de comenzar a resolver las preguntas, lee cuidadosamente cada viñeta e investiga las palabras que desconozcas. Posteriormente, vuelve a leer las viñetas y responde en equipo las preguntas que aparecen en cada una.

             

            Viñeta 1. Acude a usted un paciente masculino de 2 años y 10 meses, sano desde el nacimiento quien en los últimos 3 meses ha presentado 2 cuadros de dolor abdominal, debilidad, cansancio, dolor en las extremidades inferiores, hipotonía y debilidad generalizada que imposibilita la marcha y la sedestación. Como único antecedente, el paciente ingirió una alta cantidad de carbohidratos (pastel y helado) el día anterior a los síntomas. Se le tomaron muestras, obteniendo como único valor alterado el potasio sérico: 1.9 mmol/L (valores normales entre 3.5 – 5.0 mmol/L).

            Puedes ayudarte del simulador para razonar de una mejor manera la viñeta clínica.

            1. Los resultados de laboratorio mencionados en el caso, ¿representan al líquido intra o extracelular?
            2. ¿Consideras que los valores de potasio sérico tienen relación con el cuadro clínico del paciente?
            3. ¿Cómo contribuye el potasio al potencial de equilibrio de la membrana celular?
            4. ¿Qué síntomas esperarías encontrar en un paciente con los niveles elevados o disminuidos de potasio?

            Comentario: Para que exista un potencial eléctrico en la membrana celular es fundamental el paso de iones del espacio intracelular al extracelular y viceversa, a través de canales transportadores de iones. Esto es necesario para que la célula pueda recibir y transmitir impulsos hacia otras células vecinas y así compartir información. Cuando uno de dichos canales se ve alterado, se producen enfermedades denominadas canalopatías. Al dispararse un potencial de acción, ingresan numerosas cantidades de Na+ al espacio intracelular, por lo que para regresar a los valores de potencial de membrana a sus valores negativos en reposo es necesario que los canales de potasio dependientes de voltaje se activen para permitir el paso de K+ al espacio extracelular y así disminuir el voltaje de la membrana celular hacia los valores de iniciales de reposo. El paciente en cuestión padece una canalopatía llamada parálisis periódica hipocalémica familiar, en la cual los canales de salida de potasio dependientes de voltaje se ven alterados.

            1.      ¿Qué esperas que suceda en el potencial de membrana en reposo en pacientes con esta enfermedad?
            2. ¿Qué cambios se esperarían en el umbral para desencadenar un potencial de acción?

             

            Si deseas conocer más a detalle el caso clínico de la actividad, puedes consultar el artículo completo en las referencias (5)

            Viñeta 2. Llega a urgencias un paciente masculino de 48 años con deshidratación y dolor abdominal. Después de realizar el interrogatorio y la exploración física, se solicitan laboratorios de acuerdo con la sospecha diagnóstica. Los resultados de los laboratorios (glucosa 268 mg/dl, bicarbonato 12 meq/L, pH 7.2 y una cetonemia moderada) confirman el diagnóstico de cetoacidosis diabética, una complicación aguda de la diabetes mellitus tipo 2, por lo que se inicia tratamiento con insulina y soluciones intravenosas (para corregir la deshidratación). Después de algunas horas, mejora la hiperglucemia y la acidosis, pero el paciente empieza a presentar debilidad muscular e hiporreflexia. Adicionalmente, el electrocardiograma presenta anomalías y se detecta distensión abdominal con disminución de ruidos peristálticos. Entonces, uno de los residentes explica que la insulina es una hormona que, además de permitir la entrada de glucosa a las células, favorece el movimiento de potasio del líquido extracelular al intracelular. Se miden los electrolitos séricos y se encuentra hipopotasemia grave, por lo que se inicia tratamiento con cloruro de potasio (KCl) intravenoso.

            Con ayuda del simulador, responde las siguientes preguntas. Selecciona la ecuación de Goldman a 37 °C y los valores de célula genérica.

            1. ¿Qué cambio genera en el potencial de membrana una disminución del potasio extracelular? ¿Se vuelve más negativo (hiperpolarización), menos negativo (despolarización) o no se modifica? Justifica tu respuesta. (Al utilizar el simulador, puedes disminuir la [K+]0 a 1 mM.)
            2. La insulina administrada no solo cambió la concentración extracelular de potasio, sino que aumentó la permeabilidad al potasio de la membrana celular. ¿Qué efecto tiene en el potencial de membrana el incremento de la permeabilidad al potasio? ¿Lo hace más o menos negativo? ¿Lo aleja o acerca al EK? Justifica tu respuesta. (En el simulador, puedes incrementar por tres la permeabilidad para observar el cambio.)
            3. Ahora prueba disminuir la concentración de potasio extracelular a 1 mM y aumentar su permeabilidad por tres de manera simultánea, lo cual es una aproximación de lo que ocurrió con el paciente de la viñeta. ¿Cuánto cambió el potencial de membrana con respecto al basal? ¿La magnitud del cambio fue mayor que antes? ¿Por qué?

            Comentario: la hipopotasemia hiperpolariza a las células. Esto se debe a que el incremento en el gradiente de concentración de potasio vuelve más negativo su potencial de equilibrio (EK), como se deduce de la ecuación de Nernst. A su vez, el EK es el que tiene más influencia sobre el potencial de membrana en reposo, como se infiere a partir de la ecuación de Goldman. Si se incrementa la permeabilidad al potasio, esta influencia aumenta todavía más. La combinación de estos factores afecta a las células excitables, disminuyendo su excitabilidad. Las consecuencias son principalmente cardíacas (arritmias), musculares (debilidad, hiporreflexia) e intestinales (íleo paralítico). Por ello, antes de dar grandes cantidades de insulina a un paciente, se debe corroborar la concentración de potasio sérico, calcular la magnitud esperada de su descenso y, si está indicado, administrar KCl de manera oportuna.

             

             

            REFERENCIAS

            1. Boron & Boulpaep. Fisiología Médica. 3ª Edición. Madrid: Elsevier. 2017
            2. Guyton & Hall. Tratado de Fisiología Médica. 13 ª Edición. España: Elsevier. 2016.
            3. Kandel, E; Schwartz, J y Jessell, T. (2000). Principios de Neurociencia. Cuarta edición. Editorial McGraw Hill Interamericana. Madrid. España. 2000.
            4. Vélez MM, Carrizosa J, Cornejo W. (junio 2002). Parálisis periódica hipocalémica familiar (PPHF): Reporte de un caso y revisión del tema. IATERIA, 15, 114-120.
            5. Goldman L. (1961). The effect of stretch on the conduction velocity of single nerve fibers in Aplysia. Journal of cellular and comparative physiology, 57, 185–191. https://doi.org/10.1002/jcp.1030570306
            6. Moreno Gómez, M. del M., & García Romanos, F. (2021). Clinical case: atypical presentation of multiple sclerosis in a 42-year-old patient. Atencion Primaria Practica, 3(1), 100082. https://doi.org/10.1016/j.appr.2021.100082
            7. Hille B. Ionic channels in excitable membranes. Current problems and biophysical approaches. Biophys J. 1978 May;22(2):283-94. doi: 10.1016/S0006-3495(78)85489-7. PMID: 656545; PMCID: PMC1473440.

             

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            Mecanismos de transporte a través de la membrana celular

            Mecanismos de transporte a través de la membrana celular

            Objetivo de aprendizaje

            Explicar el movimiento de iones y agua a través de la membrana celular como un concepto fundamental de la fisiología.

            Resultado de aprendizaje 

            Explica los términos de difusión y ósmosis a través de la experimentación.

            Discute las características estructurales de la membrana celular y los mecanismos de transporte a través de ella.

            Glosario de términos

            Difusión: Es el fenómeno en el que las moléculas en disolución se desplazan a favor de un gradiente de concentración, no requiere una membrana.

            Difusión simple: Es el fenómeno en el que las moléculas o iones pasan directamente a través de la membrana, a favor del gradiente de concentración.

            Difusión facilitada: Es el fenómeno en el que se requieren proteínas transmembranales para que algunas moléculas puedan difundir a favor de un gradiente de concentración, no requiere energía.

            Ósmosis: Se define como el paso de agua desde una solución de baja concentración de soluto hacia una solución de alta concentración de soluto, separadas ambas soluciones por una membrana semipermeable.

            Ion: Son átomos o grupos de átomos que tienen una carga eléctrica. Los iones con una carga positiva se denominan cationes y los que tienen carga negativa se denominan aniones.

            Osmolaridad: Es la medida usada para expresar la concentración total de sustancias en disoluciones (osmoles/litro). En un organismo normal la concentración está alrededor de 290 miliosmoles.

            Osmolalidad: Es la concentración molar del conjunto de moléculas osmóticamente activas en un kilogramo de solvente.

            Ecuación de Van´t Hoff: Se utiliza para calcular la presión osmótica en sustancias con electrolitos:

            π = CGRT

            Donde: C= concentración total de solutos, G= constante que representa el grado de disociación de un electrolito, R= constante de los gases, T= temperatura en grados Kelvin.

              1. Introducción

              Debido a sus características fisicoquímicas, el agua se considera como el disolvente universal. En los sistemas biológicos, esta premisa es importante ya que el agua corresponde al principal componente. En el varón adulto promedio, el agua constituye del 50 al 70 % de la masa o peso corporal total (PCT). Dicho porcentaje se puede dividir en líquido intracelular (LIC = 40% del PCT) y líquido extracelular (LEC = 20 % del PCT), subdividida a su vez en agua plasmática (5% del PCT) y agua intersticial (15% de PCT), esto se puede observar en la figura 1.

              Figura 1. Distribución de agua en los compartimientos corporales. Los hombres tienen aproximadamente 60% de agua en el organismo, mientras que las mujeres tienen un menor porcentaje rondando el 55%. De esta cantidad de agua, 2/3 corresponderán a LIC y 1/3 a LEC, del cual el 80% se encontrará en el líquido intersticial y 20% en el plasma.

               

              El contenido de agua y solutos en estos compartimentos no es estático, cambian debido a su movimiento por los procesos de difusión (solutos) y ósmosis (solvente).

              El transporte de solutos se clasifica en pasivo si no requiere energía metabólica o activo si requiere la hidrólisis de ATP. La difusión simple y facilitada son ejemplos de transporte pasivo; mientras que, el transporte activo se divide en primario o secundario (figura 2).

              La difusión simple es el proceso por el cual un gas o un soluto disuelto se expande como consecuencia del movimiento aleatorio (energía cinética) de sus moléculas hasta llenar todo el espacio disponible, por lo cual no requiere atravesar una membrana.

              La difusión facilitada ocurre cuando un soluto difunde a través de una membrana semipermeable gracias a proteínas transportadoras a favor de su gradiente de concentración, de lo contrario, sólo será posible su traslado por medio de transporte activo.

              Por otro lado, el movimiento neto de agua a través de la membrana semipermeable se conoce como ósmosis. Este movimiento requiere un gradiente de concentración de solutos, de tal manera, que el paso de agua irá del lugar donde hay menos solutos a donde hay más.

              Figura 2. Diagrama que esquematiza los diferentes tipos de transporte. El transporte de partículas se puede clasificar en pasivo si no requiere energía metabólica y activo si utilizará energía. Dentro del transporte pasivo podemos describir a la difusión simple y facilitada. El transporte activo se puede clasificar como primario o secundario.

              El movimiento de agua a través de la membrana plasmática determina el volumen celular. La regulación de dicho volumen es muy importante, ya que las células animales no pueden soportar la entrada de grandes cantidades de agua, debido a que entran en un estado de turgencia (es decir, se hinchan), e inclusive, pueden llegar a lisarse (explotar). Si una célula es colocada en un medio con una concentración de solutos mayores (hipertónico) que aquellos que hay en el espacio intracelular y la membrana es poco permeable a dicho soluto, el agua intracelular saldrá de la célula. En cambio, si es colocada en una solución con menor concentración de solutos (hipotónico) en comparación con los que están presentes en el interior celular, el agua de la solución entrará en la célula (figura 3). El movimiento del agua en estas condiciones se denomina ósmosis, la presión necesaria para evitar dicho movimiento se denomina presión osmótica (ecuación de Van´t Hoff, encontrada en el glosario).

              Figura 3. Ejemplo de ósmosis en los eritrocitos en diferentes medios con distinta tonicidad. La tonicidad es la osmolaridad de una solución comparada con la osmolaridad del plasma.

              Los solutos que promueven el movimiento de agua de un lado al otro de la célula son denominados osmóticamente activos. Es importante aclarar que la cantidad de partículas osmóticamente activas no siempre es igual a la concentración de dicho soluto. Por ejemplo, la sal común (cuya fórmula química es NaCl) tiene por cada molécula de sal dos partículas osmóticamente activas, los iones sodio y cloruro. La cantidad de partículas osmóticamente activas por litro de agua se denomina osmolaridad. Recordemos que el agua es una molécula anfipática, lo que quiere decir que tiene una carga negativa (O) y positiva (H+) por lo que puede ser atraída por cargas tanto positivas como negativas.

              Los iones que se mueven a través de la membrana celular además poseen carga eléctrica, el Na+ por ejemplo tiene carga positiva, mientras que el Cl está cargado negativamente. Los iones presentes al interior y exterior celular se encuentran por lo tanto en diferente concentración química y con diferentes cargas eléctricas. La diferencia de concentración química en ambos lados de la membrana promueve el movimiento de los iones, generando así cambios rápidos en las cargas acumuladas a ambos lados de la membrana (polarización de la membrana), dichos cambios provocan una diferencia de voltaje que se conoce como potencial de membrana. Así, el movimiento de los iones provoca un potencial de membrana generado por difusión.

               

              1. Actividades en la sesión

              Se recomienda dividir al grupo en equipos para que cada equipo realice un experimento, o en su caso seleccionar alguno de los experimentos para trabajar de forma grupal y favorecer el desarrollo del resultado de aprendizaje.

              Experimento 1. Factores que influyen en la difusión de una molécula en solución: Temperatura

              Material: 2 vasos de plástico transparente, agua destilada a temperatura ambiente, agua destilada caliente y colorante líquido.

              En un vaso de precipitados coloca la mitad de su volumen en agua a temperatura ambiente, en otro vaso coloca la misma cantidad de agua a temperatura elevada (se recomienda calentar hasta punto de ebullición y dejar reposar 10 min antes de usarse). Adiciona a cada vaso una gota de colorante y registre el tiempo en que ocurre la difusión del colorante.

              ¿En cuál experimento difundirá más rápido el colorante?, ¿por qué?

              ¿Es posible saber la velocidad de difusión del colorante?, ¿cómo la obtendrías?

              Experimento 2. Ósmosis en una membrana biológica

              Material: 1 huevo (se proporcionan dos por si la membrana se rompe),1 popote transparente, 1 barra de silicón, 1 pistola para silicón, colorante líquido, vaso de precipitados donde quepa el huevo, agua destilada y tijeras.

              1. Tome un huevo y retire cuidadosamente un poco del cascarón sin romper la membrana que separa el cascarón de la clara, de preferencia hacer esto en el extremo más ancho, ya que es más fácil romper el cascarón sin romper la membrana (figura 4A).
              2. Posteriormente, perfora el vértice opuesto de manera que sea posible introducir un popote al interior del huevo, el popote en el huevo debe estar en contacto con la clara, sin romper la yema. Sella herméticamente el espacio entre el popote y el huevo con ayuda de la pistola de silicón y vierte un poco de agua con colorante en el popote hasta ver con claridad un nivel de agua en el popote (figura 4B).
              3. Finalmente, coloca el huevo con la membrana expuesta hacia abajo dentro del vaso previamente llenado con agua destilada a temperatura ambiente. Es importante que la membrana esté sumergida en el agua (Figura 4C).

                • Figura 4. Ósmosis en una membrana biológica

                  4. Marca el nivel de agua al inicio y cada 10 minutos por una hora, registre sus datos y construya una gráfica (mm/minutos).

                  ¿Qué ocurrió en este experimento? ¿Cómo se puede explicar este fenómeno?

                  Experimento 3. Ósmosis en una membrana sintética

                  Material: 10 gr de azúcar, 35 ml de agua destilada, 2 bolsas de celofán, plumones, ligas, 2 recipientes de 500 ml, 1 litro de agua de la llave y 1 jeringa de 20 ml.

                  1. Vierte los 10 gramos de azúcar en 20 ml de agua destilada. Con ayuda de la jeringa, separa 5 ml de la solución que acabas de preparar y agrega 10 ml de agua destilada. Ahora tenemos 15 ml de solución saturada y 15 ml de una solución diluida.
                  2. Toma dos bolsitas de celofán y etiquétalas con la leyenda “saturada” y “no saturada”, a cada una viérteles la solución de 15 ml según corresponda y amárralas con un hilo o liga para evitar derrames.
                  3. Coloque las bolsitas en un recipiente con al menos 500 ml de agua de la llave y deja las bolsitas en el recipiente con agua al menos durante 2 h.
                  4. Posteriormente, retira las bolsitas del agua y con la jeringa mide el volumen final de cada bolsita.

                  ¿Hay alguna diferencia entre los volúmenes inicial y final de cada experimento?

                  ¿En cuál de los experimentos encontraste mayor diferencia de volumen?, ¿por qué?

                  Experimento 4. Difusión en 2D

                  Material: 1 cucharada de café soluble, agua, jeringa de 20 ml, caja de Petri con grenetina, caja de Petri con agua, celular para fotografías, regla para medir el radio, Excel para realizar la gráfica.

                  1. Prepara una solución con 1 cucharada de café soluble en 2.5 ml de agua.
                  2. Coloca sobre la mesa una caja Petri con grenetina y una con agua a temperatura ambiente y espera a que el agua se estabilice.
                  3. Agrega una gota de la solución concentrada de café en el centro de tu recipiente (debes agregarla con mucho cuidado para evitar mover el medio lo menos posible).
                  4. Toma fotografías al inicio del experimento y después de cada 15 minutos, debe ser a la misma distancia y en el mismo ángulo, debes tomar al menos 5 fotografías (figura 5).
                  5. Mide el radio del colorante en cada fotografía y realiza una gráfica, en el eje “x” coloca el valor del radio al cuadrado y en el eje “y” el tiempo. Determina la ecuación de la recta de tu gráfica y el valor de la pendiente divido entre 4 corresponderá al coeficiente de difusión del café (figura 6).

                  Figura 5. Ejemplo del experimento 4. Realiza distintas fotografías del café difundiendo en las cajas de Petri y mide el radio del colorante.

                  Figura 6. Gráfica resultante de la difusión del colorante. En el eje X podemos apreciar el tiempo en minutos, y en el eje Y el radio de la difusión del colorante, y se generó una pendiente que permite calcular el coeficiente de difusión del colorante.

                   

                  Ahora que ya tienes tu grupo control, diseña dos experimentos modificando alguna variable (temperatura del agua, concentración del café, salinidad del medio, viscosidad del medio, etc.).

                  Experimento 5. Actividad en línea

                  Revisa el contenido del siguiente enlace sobre movimiento browniano: http://prometeo.matem.unam.mx/recursos/Licenciatura/Un100/recursos/_Un_067_MovimientoBrowniano/index.html

                   

                  1. Referencias
                  1. Sharyn A. Endow, Adam P. Russell, Basics: Biophysics-A-step-by-step Introduction to concepts for students. Lesson plan: Diffusion. 2015.
                  2. Ganong, Fisiología Médica. Barret, K. E., Barman, S. M., Boitano, S., & Brooks, H. L., 25ª edición. McGraw Hill – Lange, México, 2016.
                  3. Hall, John E., Guyton & Hall Tratado de Fisiología Médica, 12ª edición, Elsevier – Saunders, Barcelona, 2011

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                Fisiología como ciencia experimental (método científico y clínico)

                Fisiología como ciencia experimental (método científico y clínico)

                Objetivos de aprendizaje

                Explica las etapas del método científico y sus diferencias con el método clínico, así como la importancia del método científico y la experimentación en la Fisiología.

                Resultado de aprendizaje

                • Comprende las fases del método científico y las compara con el método clínico.
                • Diseña hipótesis y plantea argumentos para responder preguntas de investigación, utilizando el método científico.
                • Realiza un protocolo simple para responder una pregunta de investigación.

                Glosario de términos

                Fisiopatología: Disciplina científica que se ocupa de las modificaciones ocurridas en el funcionamiento del organismo cuando sobre él actúan una o más causas de enfermedad.

                Variable dependiente:  Es un factor que se está midiendo en una investigación, la cual será afectada por otro factor conocido como variable independiente. En una relación entre variables es el efecto o el resultado.

                Variable independiente: En un contexto experimental es la variable manipulada para conocer los efectos que producirá sobre la variable dependiente. En una relación ente variables es la causa o antecedente.

                Datos cuantitativos: Variables cuyas categorías implican jerarquía, cantidad o magnitud. Son valuadas utilizando valores alineados de menor a mayor (ordinales) o una unidad de medida (intervalos o razón)

                Datos cualitativos: Variable cuyas categorías reflejan atributos o características distintas, pero no cantidad o magnitud. Ninguna categoría se asume que es mayor o menor que cualquiera de las otras categorías. Son variables nominales.

                Hipótesis: Explicaciones tentativas del fenómeno investigado que se enuncian como proposiciones o afirmaciones.

                Hipótesis de investigación: Proposiciones tentativas sobre las posibles relaciones entre dos o más variables.

                Hipótesis nulas: Contradicen a las hipótesis de investigación. Normalmente son proposiciones que niegan o refutan la relación entre variables.

                 

                1. Introducción

                El estudio científico de la naturaleza nace de la necesidad del hombre de conocer el por qué de los fenómenos que lo rodean. Las ciencias naturales abren las puertas a poder conocer el funcionamiento de los seres vivos, y especialmente una de sus ramas, la fisiología humana, se centra en el estudio del cuerpo humano. Si bien se pueden aprender datos sobre el funcionamiento del cuerpo humano a través de la lectura de textos, la mejor forma de comprender la fisiología es a través del método experimental. El laboratorio es el lugar ideal para lograr este acercamiento, siendo el lugar donde los científicos pueden probar sus hipótesis a través del método científico. En la práctica clínica, también nos enfrentamos diariamente a interrogantes sobre la naturaleza de diferentes fenómenos fisiológicos y fisiopatológicos, y la resolución de estas interrogantes se denomina “método clínico” y constituye una rica fuente de nuevos conocimientos en medicina.

                En Informática Biomédica se abordaron los temas de médico científico y método clínico, ahora utilizaremos estos conceptos y los pasos de cada uno aplicados al modelo general de homeostasis.

                Pero primero, nos gustaría exponer ¿cuál es la importancia del Laboratorio de Fisiología?

                 

                2. Fisiología como ciencia experimental   

                2.1 El método científico                  

                      ¿Puedes recordar los pasos del método científico que viste en IB?

                Este método asume como principal propósito la obtención de nuevos conocimientos a partir de la aplicación de las leyes de la realidad objetiva. Para su aplicación se requiere de un abordaje lógico, práctico y confiable con el propósito de abordar diversos problemas, cuestionamientos y generar nuevo conocimiento.

                El método científico se estructura en etapas sucesivas con la finalidad de obtener un conocimiento válido mediante la utilización de procedimientos, instrumentos y técnicas que resulten fiables y permitan minimizar la influencia de la subjetividad del investigador.

                Se compone de los siguientes pasos:

                i. Observación y pregunta de investigación: Identificación de un fenómeno de interés.

                ii. Planteamiento de la hipótesis: Es una conclusión no probada que intenta explicar un fenómeno. Debe ser: a) verificable, b) específica, c) medible y susceptibles de ser descritas y, d) simples y claras.

                Hipótesis nula: Proposición en la cual se establece la ausencia de relación entre las variables.

                Hipótesis alterna: Proposiciones tentativas sobre la amplia gama de posibilidades o respuestas a la pregunta de investigación.

                iii. Recolección de datos: Estos datos son obtenidos mediante del uso de nuestros sentidos o por medio de distintos instrumentos como cámaras, microscopios, amplificadores, entre otros.

                iv. Análisis de los datos: Dependerá del tipo de datos colectados (cuantitativos o cualitativos).

                v. Conclusiones: En esta sección se ponen en contexto los resultados obtenidos, discutiendo con la literatura relacionada y se resaltan los hallazgos del experimento. También se pueden discutir nuevas ideas para investigaciones futuras (perspectivas).

                 

                2. 2 El método clínico

                Hoy en día se concibe al método clínico como “el método científico aplicado al trabajo con los pacientes, con peculiaridades que permiten el estudio de los enfermos”. En este sentido, cabe resaltar que un método no es derivado del otro, y por el contrario a lo largo de la historia el método clínico se ha visto muy enriquecido por el método científico, principalmente a partir del s. XIX con los aportes de Claude Bernard, quien aplicó la experimentación y la investigación científica en la medicina clínica.

                Podemos delimitar al método clínico como el proceso sistemático que implica un análisis lógico y ontológico, con el objetivo de la atención del individuo, por lo que requiere del conocimiento del proceso salud-enfermedad, y que por lo tanto, no solo involucra el conocimiento clínico, sino también el epidemiológico y el social. De forma teórica se han descrito cuatro estrategias en el método clínico:

                • Estrategia de reconocimiento patrón: Descripción aprendida previamente (o patrón) de la enfermedad.
                • Estrategia de arborización: Vías potenciales preestablecidas mediante un método en que la respuesta a cada interrogante diagnóstica determina de manera automática la siguiente pregunta y finalmente lleva al diagnóstico correcto.
                • Estrategia exhaustiva: Investigación concienzuda e invariable de todos los hechos médicos respecto del paciente, seguida de la selección de los datos útiles para el diagnóstico.
                • Estrategia hipotético-deductiva: Es la formulación, a partir de los primeros datos acerca del paciente, de una lista breve de diagnósticos o acciones potenciales, seguido de la realización de aquellas conductas clínicas (historia y examen físico) y paraclínicas (estudios de gabinete o laboratorio) que reducirán mejor la longitud de la lista.

                La delimitación de un problema médico, la posterior formulación de una pregunta clara y precisa que pueda ser respondida por varias hipótesis y después, una vez formulado el camino para contrastar estas hipótesis con la realidad, ayudarse de todas las herramientas que tiene el clínico a la mano para aceptar o rechazar sus hipótesis, será el método que caracterizará a un médico con mente científica y es por eso que para cualquier estudiante de medicina, y profesional de la salud, es de suma importancia conocer y dominar el método científico.

                Tabla 1. ¿Puedes resumir las diferencias entre el método científico y el clínico? Llena el siguiente recuadro:

                Método científico Método clínico

                 

                 

                 

                 

                 

                 

                3. Actividades en la sesión

                Actividad 1. Explicar a los alumnos el proceso para plantear preguntas enfocadas a fisiología a partir de la observación

                Desarrollo de la actividad:

                1. Hacer un equipo de 3 o 4 personas.
                2. Incentivar a que los alumnos observen un fenómeno fisiológico (presión arterial, de la frecuencia cardiaca, de la frecuencia y amplitud respiratoria, etc.). Someter esta variable fisiológica ante algún cambio (temperatura, presión, postura, etc.).
                3. Promover la formulación de preguntas e hipótesis que respondan a los que están observando.
                4. Contrastar las preguntas realizadas por los diversos equipos.

                Ejemplos de actividades:

                https://www.youtube.com/watch?v=3U3AEzMR0hg

                https://www.youtube.com/watch?v=PhVdbkbf0e4

                Actividad 2. Ya que el alumnado ha formulado hipótesis y preguntas de investigación, el siguiente paso será

                Desarrollo de la actividad:

                1. Solicitar a los alumnos que desarrollen un plan de trabajo: ¿qué harías para responder tu pregunta de investigación?
                2. ¿Qué pasos del método científico integrarías?
                3. Realizar algún ejemplo sencillo y llegar a una posible respuesta.

                 

                1. Discusión y Conclusiones

                El alumnado debe exponer sus planes de trabajo y proyectos desarrollados en clase y obtener realimentación de su profesor o profesora.

                1. Referencias:
                • Campos M, Lima D, Fernández F, Alayola A. (2020). El razonamiento clínico en la era de la medicina digital. Informática biomédica II. 1ra edición. México: Editorial Panamericana.
                • Cannon WB. (1929). Organization for physiological homeostasis. Physiological Reviews, 9(3): p. 399-431.
                • Sampieri-Cabrera R., Bravo S., Inclán-Rubio V. (2019). Teacher Guide: Homeostasis. https://doi.org/10.5281/zenodo.2667857
                • Argimon-Pallas J.P., Jimenez-Villa, J. (2019). El proceso de la investigación clínica y epidemiológica. En J.P. Argimon-Pallas (Ed.) Métodos de investigación clínica y epidemiológica, (5ª Edición, Cap. 1, pp. 3-7) Elsevier
                • Seidel, H. M., Ball, J. W., & Dains, J. E. (2011). Vasos sanguíneos. En Seidel, H. M. (Ed.) Manual Mosby de exploración física + evolve (7ma Edición, Cap. 15, pp. 424-455). Elsevier.
                • Real Academia Nacional de Medicina (s.f.): Fisiopatología. Recuperado el 7 de agosto de 2023 de https://dtme.ranm.es/
                • Torres, R.H.S.C.P. M. (2023). Metodología de la investigación (2nd ed.). McGraw-Hill Interamericana. https://bookshelf-ref.vitalsource.com/books/9786071520326

                Figura 3. Pasos del método científico y del clínico.

                Actualización: Agosto de 2025.

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